Плодоводство
и виноградарство Юга России
Насонов Андрей Иванович
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Северо-Кавказский федеральный научный центр садоводства, виноградарства, виноделия»
лаборатория генетики и микробиологии
ст. науч. сотрудник
Статьи в журнале (всего: 11)
Изучение гнили семенной камеры плодов яблони в насаждениях двух районов Краснодарского края позволило выявить микокомплекс из 7 видов грибов: 5 видов рода Fusarium Link и 2 вида рода Alternaria Nees. Встречаемость видов на сортах и в различных садах была неоднородной. Однако для каждого сорта и сада набор видов оказался уникальным. Наибольшее число видов патогенных грибов было встречено на сорте Айдаред в Тимашевском районе. Два вида из рода Fusarium были обнаружены впервые как возбудители гнили плодов яблони в Краснодарском крае – F. solan (Mart.) Sacc. и F. semitectum Berk. & Ravenel. Оба вида найдены в Динском районе: один на сорте Ред Делишес, второй – на сорте Старкримсон. Установлено инфицирование цветков одновременно двумя или тремя патогенами, которые далее совместно развивались в семенной камере плода. Вид F. Sporotrichioides Sherb. был самым распространенным в патокомплексах. Изучение культуральных признаков изолятов выделенных в этом исследовании видов показало соответствие культуральных характеристик описанным ранее для этих таксономических единиц. У отдельных видов были отмечены различия в скорости роста, высоте, структуре и цвете воздушного мицелия. Большинство изолятов видов F. solani, F. semitectum, F. proliferatum (Matsushima), A tenuissima Kunze ex Nees et T. Nees: Fries и A. Alternata (Fries) Keissler характеризовались быстрыми темпами роста. По структуре воздушного мицелия колоний встречались гомогенные изоляты – виды F. solani, F. semitectum, F. avenaceum (Fr.) Sacc и гетерогенные изоляты – виды F. proliferatum, F. sporotrichiodes. Цвет воздушного мицелия в большинстве случаев являлся гомогенным.
С 2013 года в Краснодарском крае грибы рода Fusarium Link являются возбудителями гнили сердцевины плодов яблони, в 2019 году в составе патокомплекса выделено 7 видов этого рода. Для эффективного контроля заболевания, в патогенезе которого участвует большое количество видов, требуется проведение исследований in vitro. При этом необходимо добиться быстрого и гарантированного роста каждого из грибов. Известна значительная изменчивость морфологических и культуральных признаков фузариев при их культивировании под влиянием состава питательных сред. В связи с этим подбор для фузариевых грибов- возбудителей гнили сердцевины плодов яблони оптимальных для культивирования питательных сред является актуальным. Исследования выполнены методами лабораторного и сравнительного анализов. Изучали рост трех возбудителей гнили сердцевины плодов яблони рода Fusarium Link на 10 питательных средах. Оценивали радиальную скорость роста колонии и морфолого-культуральные признаки. В результате исследований у видов F. semitectum (Mart.) Sacc., F. sporotrichioides Sherb. и F. solani (Mart.) Sacc. установлено варьирование не только скорости роста колоний, но и их культуральных признаков в зависимости от питательной среды. Для культивирования изученных патогенных грибов были выделены морковный и томатный агары, как универсальные среды, на которых рост колонии в наших экспериментах был наиболее интенсивный. Дополнительно для каждого вида грибов предложены питательные среды: для F. solani – среда Мурасиге и Скуга; для F. semitectum – среда Мурасиге и Скуга и сусло-агар; для F. sporotrichioides – среда Ниренберга, картофельно-глюкозный агар и сусло-агар.
Производство российского вина основано на использовании активных сухих дрожжей, ввозимых в РФ из стран Европы – Франции, Германии, Италии. Между тем, известно, что высококачественные вина географического наименования необходимо производить с применением местных рас дрожжей. Поиск таких рас (штаммов) является актуальной задачей. Анализ генетического разнообразия популяций дикорастущих дрожжей и создание их коллекций является необходимым начальным этапом в создании новых перспективных штаммов для промышленного виноделия. Такие исследования постоянно проводятся в Европе для создания терруарспецефических штаммов дрожжей. Отбор проб винограда для выделения и изучения новых местных штаммов винных дрожжей проводили в виноградарских хозяйствах Темрюкского и Анапского районов Краснодарского края. Выделение ДНК, условия проведения ЦР и фрагментного анализа выполняли согласно действующим методикам. Для анализа полиморфизма длин амплифицируемых фрагментов при SSR-генотипировании использовали фрагментный анализ на автоматическом генетическом анализаторе ABIprism 3130. Полученные данные визуализировали в программе Gene Mapper v 4.1. Установлено разнообразие видов и родов дрожжей на поверхности ягод винограда. При этом «выход» сахаромицетов составил порядка 30 % от общего количества полученных моноспоровых культур для каждой из точек отбора. Приведены результаты анализа генетических взаимосвязей и ряда технологических характеристик штаммов Saccharomyces sp., выделенных из естественных популяций в ампелоценозах. Выявлено, что географический фактор влиял на возникновение генетической изоляции. Показано, что генетически удалённые штаммы проявляют значительные различия по ряду физиолого-биохимических характеристик.
Для разработки защитных мероприятий необходимо выявлять наиболее Опасные и новые вредные объекты, а также осуществлять подбор препаратов, обладающих высокой эффективностью. Но не всегда оказывается возможным оценить эффективность ингибирования химическими препаратами конкретного вида гриба, кроме того, многие фитопатогены могут приобретать определенный уровень резистентности к фунгицидам. По этой причине возникает необходимость изучения эффективности препаратов в отношении отдельных видов с помощью лабораторных методов с использованием чистых культур грибов. Метод in vitro позволяет в достаточно короткие сроки оценить эффективность химических препаратов против возбудителей болезней. Однако, существует проблема отсутствия стандартизированного метода оценки антифунгальной активности в отношении экономически значимых патогенов сельскохозяйственных культур. Исследования выполнены двумя методами в зависимости от способа внесения препарата в среду: методом укола при равномерном внесении препарата на поверхность питательной среды и рассевом конидиальной суспензии патогена микробиологическим шпателем при внесении препарата на бумажных дисках. Антифунгальная активность химических препаратов в отношении гриба Alternaria alternatа возбудителя гнили плодов яблони различалась в широком диапазоне от отсутствия эффекта до сильной, но в большинстве вариантах опыта была средней и данные, полученные двумя методами изучения, были сопоставимы. Сопоставление данных двух методов, показало различную степень воспроизводимости результатов. Так наиболее стабильные и повторяющиеся результаты давал метод с равномерным внесением рабочей концентрации препарата на поверхность питательной среды и посевом методом укола. В нашем исследовании диско-диффузионный метод оказался более трудоёмким, а эффекты, полученные данным методом, характеризовались не всегда однозначной трактовкой и различались в повторностях, в сравнении с методом, в котором фунгицид вносился непосредственно на агаровую пластину, а посев осуществлялся уколом. Необходимо провести дальнейшую оптимизацию и стандартизацию этого метода, в том числе количество вносимого инокулюма гриба и толщину, и выровненность агаровой пластинки.
Развитие резистентности Venturia inaequalis к фунгицидам со специфическим механизмом действия ставит под угрозу эффективный контроль садов против парши яблони. Была изучена чувствительность популяции возбудителя парши яблони к ципродинилу в экспериментах «доза-эффект» для трёх популяций патогена из садов Краснодарского края. Одна из популяций была собрана в заброшенном саду и являлась исходной. Остальные популяции собраны в коммерческих садах с ежегодным использованием фунгицидов, в том числе и ципродинила. Определяли влияние 7 концентраций ципродинила: 0,001, 0,01; 0,10; 0,50; 1,00; 10,00 и 50,00 мг/л на рост моноспоровых изолятов патогена на синтетической среде Леру (Leroux). Всего проанализировано 63 изолята гриба. Рост мицелия на фунгициде выражали относительно контрольного варианта среды в процентах. Концентрацию действующего вещества фунгицида, которая приводила к двухкратному торможению роста, называемую эффективной 50 % концентрацией (ЭК50), находили с использованием пробит регрессионного преобразования величины относительного роста мицелия на действующем веществе. Анализ кривых «доза-эффект», показал горметические реакции при низких концентрациях фунгицида. По результатам исследования выявили, что чувствительность исходной популяции была значительно выше, чем в двух фунгицидных популяциях на уровне значимости p